2型登革病毒感染IFNAR-/-小鼠模型

與人類相似，登革病毒感染IFNAR-/-小鼠大部分為隱形感染；但與人類不同的是，病毒感染小鼠的主要臨床癥狀為后肢癱瘓等神經(jīng)癥狀，及體重減輕等非特異性癥狀。而且，小鼠臨床癥狀嚴(yán)重程度與病毒株毒力密切有關(guān)。雖然人和小鼠模型的臨床癥狀不盡相同，但登革病毒感染IFNAR-/-小鼠可出現(xiàn)病毒血癥、血小板減少、血漿滲漏和細(xì)胞因子風(fēng)暴等人類重癥登革熱的標(biāo)志性病理表現(xiàn)。具體機(jī)制為，小鼠機(jī)體產(chǎn)生的抗登革病毒抗體與登革病毒形成免疫復(fù)合物，激活補(bǔ)體系統(tǒng)，導(dǎo)致血管的通透性增加，亦可導(dǎo)致血管水腫和破裂。

暫無介紹

病毒接種動(dòng)物后，采集小鼠全血，分離血漿，qRT-PCR法檢出病毒核酸陽性，ELISA法檢出病毒蛋白陽性，證明成功感染動(dòng)物，感染模型建立成功。 登革病毒NGC株靜脈感染IFNAR-/-小鼠，首先在單核巨噬細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞中復(fù)制，導(dǎo)致血漿病毒血癥，病毒載量峰值在感染后第4天之后出現(xiàn)；病毒刺激宿主免疫反應(yīng)，在感染后1周后產(chǎn)生針對(duì)登革病毒包膜蛋白的IgM抗體和IgG抗體。

使用100μL（1.0E+09 Copies/μL）登革病毒NGC株通過尾靜脈途徑接種IFNAR-/- 小鼠，每天觀察動(dòng)物臨床表現(xiàn)，定期檢測(cè)其血漿病毒載量、抗登革病毒抗體水平。

一、 登革熱概述

登革熱（Dengue fever, DF）是一種由登革病毒（Dengue virus, DENV）引起的急性傳染病，是傳播最廣泛的蚊媒傳染病之一。患者可在感染后1～14天，多數(shù)在5～9天后發(fā)作。癥狀包括發(fā)熱、皮疹、頭痛、肌肉和關(guān)節(jié)痛等。少數(shù)患者病情可進(jìn)一步惡化，發(fā)生危及生命的重癥登革熱（包括登革出血熱和登革休克綜合征），出現(xiàn)嚴(yán)重休克和出血，可在1～2天內(nèi)因出血性休克或中樞性呼吸衰竭而死亡。登革熱流行于熱帶及亞熱帶地區(qū)，尤其是在東南亞、太平洋島嶼和加勒比海等100多個(gè)國家和地區(qū)。隨著世界氣候變化及國際交往的增多，我國各省均有輸入病例報(bào)告，廣東、云南、福建、浙江、海南等南方省份可發(fā)生本地登革熱流行，因此，登革熱成為威脅我國人民健康安全的重要傳染病之一。

二、登革熱動(dòng)物模型簡(jiǎn)介

小鼠模型是登革病毒感染及登革熱發(fā)病機(jī)制研究的重要工具。科研人員最初使用登革病毒臨床分離株顱內(nèi)感染正常小鼠，感染效果差，且出現(xiàn)麻痹等神經(jīng)癥狀，不適合建立動(dòng)物模型。之后，鑒于干擾素的抗登革病毒作用，研究者利用缺乏IFN-ɑ/β、IFN-γ受體的AG129小鼠構(gòu)建登革病毒感染模型，但存在一定程度的免疫抑制，限制了該模型的應(yīng)用。然后，為建立免疫完整性更高的小鼠模型，使用交替?zhèn)鞔《局旮腥綢型干擾素受體敲除小鼠（Ifnar1-/-）建立小鼠模型。這些模型都未能很好的展現(xiàn)血漿滲透、血小板降低、肝腎損害等重癥登革熱的典型表現(xiàn)。基于此，本研究擬通過小鼠體內(nèi)傳代，獲得登革病毒小鼠適應(yīng)株，感染Ifnar1-/-小鼠建立重癥登革熱小鼠模型。