乳腺癌細胞4T1紅色熒光記小鼠模型

健明迪檢測提供的乳腺癌細胞4T1紅色熒光記小鼠模型,生物安全性 該小動物模型飼養在清潔級動物中,微生物處于監控狀態,動物房有相應的保護措施,小鼠不會出現逃逸,不會對外界環境造成影響,具有CMA,CNAS認證資質。
乳腺癌細胞4T1紅色熒光記小鼠模型
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生物安全性

該小動物模型飼養在清潔級動物中,微生物處于監控狀態,動物房有相應的保護措施,小鼠不會出現逃逸,不會對外界環境造成影響。

評價驗證

本模型將DsRed基因轉染到小鼠乳腺癌細胞4T1中得到了高表達DsRed細胞株。經過多次傳代表達水平穩定,標記細胞的形態、生長方式、生長速度及致瘤能力等與未轉染細胞無明顯差異,可以反映小鼠乳腺癌細胞4T1腫瘤細胞生物學行為的標記細胞。將DsRed標記的小鼠乳腺癌細胞4T1細胞經皮下接種至BALB/C小鼠,每7天用活體熒光成像系統觀察成瘤情況。發現7天即可出現腫瘤,14d、21d和28d天后腫瘤變大,熒光強度增加(圖1)。

此模型與常規模型相比具有以下優點1)無創傷性;2)可多次重復在不同時間點檢測;3)快速掃描成像(時間少于5 min);4)可以使實驗動物整體成像;5)同一實驗動物體內獲得全部時間點的整體數據。

制備方法

1. 表達載體構建:構建chicken β-actin-DsRed-NEO載體。CAG啟動子由巨細胞病毒(thecytomegalovirus,CMV)早期增強子(earlyenhancer element)和雞β-肌動蛋白( chickenbeta-actin )啟動子組成,用于驅動基因在哺乳動物載體的高水平表達。

2. 4T1-DsRed熒光細胞的獲得:采用脂質體2000轉染小鼠乳腺癌細胞4T1細胞,轉染后24 h,用含有G418的培養液篩選細胞三周,獲得穩定表達GFP的細胞株,選擇其中高表達的克隆株擴大培養。

3. 腫瘤細胞的植入及活體熒光成像:收集處于生長對數期的轉染細胞,稀釋至5×106/mL。取BALB/c小鼠進行皮下接種,1×106個細胞/只。分別在接種的第7、14、21和28天四個時間點觀察腫瘤的生長及轉移情況情況。觀察前每只小鼠腹腔注射飽和三溴乙醇(0.18 mL/10g)麻醉后放入活體熒光影像系統攝像,Slide Book 4.0軟件進行分析。

研究背景

女性乳腺是由皮膚、纖維組織、乳腺腺體和脂肪組成的,乳腺癌(breast cancer)是發生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤。乳腺癌中99%發生在女性,男性僅占1%。乳腺并不是維持人體生命活動的重要器官,原位乳腺癌并不致命;但由于乳腺癌細胞喪失了正常細胞的特性,細胞之間連接松散,容易脫落。癌細胞一旦脫落,游離的癌細胞可以隨血液或淋巴液播散全身,形成轉移,危及生命。目前乳腺癌已成為威脅女性身心健康的常見腫瘤。早期乳腺癌往往不具備典型的癥狀和體征,不易引起重視,常通過體檢或乳腺癌篩查發現。乳腺腫塊、乳頭溢液、皮膚改變、乳頭、乳暈異常、腋窩淋巴結腫等為乳腺癌的典型體征。

小鼠乳腺癌細胞4T1來自ATCC,是從410.4瘤株中未經誘變篩得的6-硫鳥嘌呤抗性細胞株。當注射到BALB/c 小鼠中時,4T1自發產生高轉移腫瘤,可轉移到肺,肝,淋巴結和大腦,同時在注射部位形成始發灶。誘導轉移時不需要摘除始發灶。4T1細胞在BALB/c小鼠中的生長與轉移特性與人體中的乳腺癌十分相近。

細胞接種動物為BALB/c小鼠,BALB/c 是白色變種實驗室用鼠,起源于小家鼠Mus musculus,廣泛用于免疫學、生理學的動物實驗

模型信息

中文名稱:乳腺癌細胞4T1紅色熒光記小鼠模型

英文名稱:4T1-DsRed

類型:乳腺癌動物模型

分級:NA

用途:用于乳腺癌(breast cancer)研究。

研制單位:中國醫學科學院醫學實驗動物研究所

保存單位:中國醫學科學院醫學實驗動物研究所

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