細胞增殖實驗

檢測流程

1、寄樣

2、初檢

3、報價

4、簽訂保密協議

5、開始實驗

6、結束實驗

7、后期服務

以上是對于細胞增值實驗的相關介紹，如有其它檢測需求可以咨詢實驗室工程師，為您一對一服務。

第三方檢測報告用途

1、銷售使用

2、研發使用

3、工業問題診斷

4、科研論文/市場抽檢數據使用

5、投標競標

6、項目工程等

我們的檢測優勢

1、健明迪檢測是雙高新技術企業，檢測資質齊全，實驗室儀器先進，科研團隊強大。

2、多家實驗室分支，總部位于北京，在上海、廣州、江蘇、濟南、四川等都有分支實驗室。

3、初檢樣品，初檢之后根據客戶檢測需求以及實驗復雜程度進行報價。

4、檢測周期短，檢測費用低，實驗方案齊全。

5、檢測報告認可，支持掃碼查詢真偽，檢測報告認可度高。

二、方法和步驟

實驗一：細胞增殖分析

1、制備細胞懸液：細胞計數。

2、接種到96孔板中：根據合適的鋪板細胞數(約1-2×104)，每孔約100ul細胞懸液，同樣的樣本可做4-6個重復。

3、37℃培養箱中培養：細胞接種后貼壁大約需要培養4小時，如果不需要貼壁，這步可以省去。

4、加入10ul CCK8：由于每孔加入CCK8量比較少，有可能因試劑沾在孔壁上而帶來誤差，建議將槍頭浸入培養液中加入且在加完試劑后輕輕敲擊培養板以幫助混勻。或者直接配置含10%CCK8的培養基(現用現配)，以換液的形式加入。

5、培養0.5-4小時:細胞種類不同，形成的Formazan的量也不一樣。如果顯色不夠的話，可以繼續培養，以確認最佳條件(建議預實驗先摸清楚時間點)。特別是血液細胞形成的Formazan很少，需要較長的顯色時間(5-6小時)。

6、測定450nm吸光度：建議采用雙波長進行測定，檢測波長450-490nm，參比波長600-650nm。

實驗二：細胞毒性分析

1、制備細胞懸液：細胞計數

2、接種到96孔板中：根據合適的鋪板細胞數(約≥5×104)，每孔約100ul細胞懸液，同樣的樣本可做4-6個重復。

3、37℃培養箱中培養：細胞接種后貼壁大約需要培養4小時，如果不需要貼壁，這步可以省去。

4、加入不同濃度的毒性物質。

5、37℃培養箱中培養：加入毒性物質的培養時間，要看毒性物質的性質和細胞的敏感性，一般要根據細胞周期來決定，起碼要一代以上的時間(例如：6、12、24、48、60、72小時)。

6、加入10ul CCK8：由于每孔加入CCK8量比較少，有可能因試劑沾在孔壁上而帶來誤差，建議將槍頭浸入培養液中加入且在加完試劑后輕輕敲擊培養板以幫助混勻。

7、培養0.5-4小時:細胞種類不同，形成的Formazan的量也不一樣。如果顯色不夠的話，可以繼續培養，以確認最佳條件。特別是血液細胞形成的Formazan很少，需要較長的顯色時間(5-6小時)。

8、測定450nm吸光度：建議采用雙波長進行測定，檢測波長450-490nm，參比波長600-650nm。

一、所需設備及儀器

1. 10ul，100-200ul及多通道移液器

2. 酶標儀(帶有450nm濾光片)

3. 96孔培養板

4. 二氧化碳培養箱