胸主動脈縮窄致心肌肥厚小鼠模型

動物癥狀觀察：

表現為體重減輕、弓背豎毛，在回輸后的一個月后死亡。

TAC重建是誘導心肌肥厚和心衰的常用方法，其機制是主動脈經結扎重建后，心臟左室負荷增加，心肌發生代償性肥厚反應。TAC誘導的心肌肥厚模型可重復性強，并且其誘導的模型呈現漸行性心衰過程，所以應根據實驗設計需要，選擇重建小鼠不同的發展時期作為相關心臟疾病研究的模型。

1） 術后1周，經超聲多普勒檢測小鼠IA及LCCA血流強度，IA/LCCA比值與術后4周時小鼠舒張期左室后壁厚度（LV posterior wall at end-diastole, LVPWD）呈線性相關（LVPWD=0.4252㏑(IA/LCCA) – 0.1748），即當IA/LCCA>5.9時，TAC小鼠LVPWD顯著增厚（P<0.05），即此TAC小鼠符合心肌肥厚模型入選標準（圖1-2）。

注：A.Sham組小鼠主動脈弓處B型超聲截圖，紅色橢圓形區域為理論上結扎動脈重建處，黃色箭頭指示為IA，綠色箭頭指示為LCCA，藍色箭頭指示為左鎖骨下動脈LSA；B. 多普勒檢測Sham組小鼠IA血流；C. 多普勒檢測Sham組小鼠LCCA血流；D. TAC組小鼠主動脈弓處B型超聲截圖，紅色箭頭指示結扎線位置；E.多普勒檢測TAC組小鼠IA血流；F. 多普勒檢測TAC組小鼠LCCA血流。

圖1. B型超聲及多普勒檢測小鼠動脈重建情況.

Note: A. Representative B-mode echocardiographicimages of aortic arch on Sham mice, the red round is reconstruction position, yellow arrowis IA, green arrow is LCCA, blue arrow is LSA; B. Doppler analysis of IAflow on Sham mice;C. Doppler analysis of LCCA flow on Sham mice; D. Representative B-modeechocardiographic images of aortic arch on TAC mice, the red arrow point theposition of ligature wire; E. Doppler analysis of IA flow on TAC mice; F.Doppler analysis of LCCA flow on Sham mice.

Fig. 1Analysis of aortareconstruction by B-mode and Doppler analysis

注：IA/LCCA，無名動脈/左頸總動脈血流比值；LVPWD，左室后壁厚度.

圖2. 術后1周IA/LCCA與術后4周LVPWD相關性分析

Note: IA/LCCA,innominate artery flow/left common carotid artery flow; LVPWD, left ventricle posterior wall at end-diastole.

Fig.2 Relevanceanalysis between IA/LCCA ratio 1 week and LVPWD4 weekafterreconstruction

2） TAC小鼠在術后2-6周內呈現代償性肥厚，此時期小鼠可作為心肌肥厚相關 研究的理想模型。具體表型：心室壁增厚（術后4周時，LVPWD增加36.7%（TAC versus Sham）），心肌收縮力增強，全心增大（HW/BW增加42.9% （TAC versus Sham）），心肌細胞排列不齊，纖維化增高。

3） TAC小鼠在術后8-10周，心臟功能失代償并以時間依賴的方式逐漸發展為心衰。具體表型：心室擴張，室壁變薄，心肌收縮力下降，心肌細胞出現斷裂溶解。經Spss16.0軟件Kaplan-Meier curves分析至術后8周時C57BL/6J小鼠經重建后，其生存率為85.0% (n=40)，而假手術組小鼠的生存率為96.4% (n=28) (P=0.128)（圖3）。

注：Spss16.0軟件分析至術后8周時，TAC組小鼠生存率為85.0% (n=40)，而Sham組小鼠的生存率為96.4% (n=28)。

圖3 重建小鼠生存率分析

Note：The survival rate was 85.0% (n=40) of TAC group and 96.4% (n=28) of Sham group till 8 weeks afterthe construction analysed by SPSS 16.0 software.

Fig. 3 Survival analysis onconstruction mice

1）小鼠經麻醉備皮，固定于手術操作板上；

2）小鼠經口氣管插管連至呼吸機（頻率為125-150次/分鐘）；

3） 上起咽部，切口開至第二肋間隙行開胸手術；

4） 分離胸腺及主動脈外包繞脂肪，于無名動脈（innominateartery (IA)，即頭臂動脈干(brachiocephalictrunk)）和左頸總動脈（leftcommon carotid artery, LCCA）間主動脈弓下備線并打活結備用，拉活結將27G平針頭和主動脈系緊，此時即獲得理論直徑約為0.4mm的無名動脈遠端主動脈弓重建血管。

5） 縫合胸骨及皮膚，待小鼠恢復自主呼吸后撤氣管插管；

6）小鼠置于鼠籠內恢復俯臥位，注意保暖，如呈現脫水現象可腹腔注射生理鹽水。

心肌肥厚是心臟功能從代償期轉向失代償的關鍵階段，是心力衰竭的重要病理生理基礎，主要包括生理性肥厚和病理性肥厚。心肌肥厚是導致臨床心血管疾病的獨立風險因素，并可使得心血管病人死亡率至少提高兩倍。心肌肥厚主要發生在長期壓力負荷過重的情況下，心肌總量增加，收縮力加強，但長期功能代償會最終導致心肌收縮力減退，失代償并轉為心衰。臨床癥狀包括呼吸困難，胸痛，乏力，心悸，晚期出現心力衰竭。