心肌缺血再灌注大鼠模型

健明迪檢測提供的心肌缺血再灌注大鼠模型,討論與結論 動物癥狀觀察: 表現為體重減輕、弓背豎毛,在回輸后的一個月后死亡,具有CMA,CNAS認證資質。
心肌缺血再灌注大鼠模型
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討論與結論

動物癥狀觀察:

表現為體重減輕、弓背豎毛,在回輸后的一個月后死亡。

生物安全性

實驗中涉及動物的操作程序已經得到中國醫學科學院醫學實驗動物研究所實驗動物使用與管理委員會的批準(ILAS-GC-2012-001)。

評價驗證

1.術中心電圖:如結扎成功,心電圖將會出現ST段抬高。

2.再灌注28天彩超

假手術組心室大小正常,前壁運動良好,手術組心室明顯擴大,前壁幾乎無運動。

3.再灌注24小時心肌梗死面積

4.再灌注28天masson染色

制備方法

1.SD大鼠 ,名稱:SS/JrHsdMcwiCrlVr,近交系(Inbred Rat)

品系來源 :動物來源:由美國的Sprague & Dawley農場的R.W.Dawley用雜合的雄性大鼠和Wistar雌性大鼠雜交后育成的一個白化封閉群大鼠,1950年傳入美國的癌癥研究所(CRL),1955年進行生物凈化,1964年傳入美國各地,同時傳入法國。1992年自美國NIH引入到中科院上海實驗動物中心。 動物外部特征:白化 遺傳基本組成:遠交群大鼠 種群數:核心群35對,增殖群100對 特點:生長快,繁育性能好,大多用于安全性試驗及營養與生長發育有關的研究。該品系對性激素敏感,對呼吸道疾病有較強的抵抗力。

2.心肌缺血/再灌注損傷大對照鼠SS-13BN Rat,名稱:SS-Chr13BN/McwiCrlVr,

?同類系(Consomic Rat)

3.誘導方法

1)大鼠稱重后,使用2%戊巴比妥(用生理鹽水配置),按0.3ml/100g體重經腹腔麻醉。根據大鼠四肢肌張力確定麻醉良好后,仰位固定大鼠于手術臺上,頸前區及心前區剃毛。

2)頸前區消毒,剪開頸部正中皮膚,分離組織,沿氣管方向進行氣管插管,氣管導管接呼吸機,參數設置:潮氣量 2ml/100g體重,頻率55-60次/min,吸呼比 1:1。

3)心前區消毒,于胸骨左緣第四肋水平剪開長約2cm的水平切口,鈍性分離皮膚與肌肉,于胸骨左緣第 4 肋間隙開胸,剝開心包,暴露心臟,在肺動脈圓錐與左心耳之間,隱約可見心肌層下面細小、透亮、粉紅左主冠狀動脈前降支。

4)無創小圓針5-0絲線在左心耳下緣前降支左側進針,進針深度控制在 1mm,寬度為3mm 左右,器械打一活結,造成暫時心肌缺血,45min 后松開絲線恢復冠脈血流。假手術組左主冠狀動脈僅穿線不結扎。

5)通過肉眼觀察結扎前后左室前壁的局部顏色變化,判斷模型是否成功。結扎成功時,可見受累左室局部瞬間蒼白,隨即發紺、腫脹以及收縮力下降,成功再灌注時數秒內左室局部迅速充血,缺血心肌顏色由暗紅變為鮮紅。

6)依次縫合關閉肋間隙,肌肉,以及皮膚,酒精消毒皮膚。觀察大鼠直至蘇醒。

研究背景

近年來隨著動脈搭橋術、溶栓療法、經皮腔內冠脈血管形成術、心臟外科體外循環等方法的推廣應用,使心肌梗死后重新得到血液再灌注。多數情況下,缺血后再灌注可以使心肌功能恢復,但有時不僅不能改善心肌功能,反而加重心肌細胞的損傷,即心肌缺血再灌注損傷(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)。然而心肌梗死最主要的治法仍是血管再通、恢復心肌細胞的血流供應,如何預防缺血再灌注的損傷仍是目前待解決的問題。

MIRI的發病機制尚未徹底闡明,目前認為自由基的作用、細胞內鈣超載及白細胞的激活是缺血再灌注損傷的重要發病環節。[1]當組織細胞缺血缺氧時OFR清除系統功能降低或喪失,而生成氧自由基的系統活性卻增強,一旦恢復組織血液供應和供氧,OFR便會出現大量且急劇的堆積,其會以不同方式造成細胞急性或慢性損傷。[2]細胞內鈣超載引起的損傷機制與以下幾點有關①大量鈣離子涌入細胞,觸發線粒體、肌漿網攝取鈣離子,從而消耗大量ATP,同時鈣離子形成不溶性的磷酸鈣,抑制線粒體ATP合成,加重細胞能量代謝障礙,[3] ②胞內鈣離子增多,則鈣依賴性蛋白酶活性增強,后者使黃嘌呤脫氫酶轉化為黃嘌呤氧化酶,從而增加氧自由基生成。③胞內鈣離子升高,可激活某些ATP酶,從而水解細胞高能磷酸鹽,產生大量的氫離子加重細胞內酸中毒。④鈣離子增多還能激活磷脂酶類,使膜磷脂降解,導致細胞膜及細胞器膜受損。 [4] 白細胞尤其是中性粒細胞在缺血組織聚集浸潤,對心肌缺血及再灌注損傷的發生及嚴重程度起到了重要作用[5,6]激活的中性粒細胞及血管內皮細胞釋放大量的致炎物質,如自由基、蛋白酶、溶酶體等,不但改變了自身結構和功能,而且造成周圍組織細胞損傷。

模型信息

中文名稱:心肌缺血再灌注大鼠模型

英文名稱:SS/JrHsdMcwiCrlVr

類型:心肌缺血再灌注病變動物模型

分級:NA

用途:用于心肌缺血再灌注病變(myocardial ischemia reperfusion injury)研究。

研制單位:中國醫學科學院醫學實驗動物研究所

保存單位:中國醫學科學院醫學實驗動物研究所

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