脊髓灰質炎恒河猴模型

健明迪檢測提供的脊髓灰質炎恒河猴模型,討論與結論 1.病毒滴度的變化:接種病毒后,動物肺組織PVM?RT-PCR檢測可檢出病毒,病毒滴度在感染后3天達到高峰,并可維持至7日,隨后滴度下降,具有CMA,CNAS認證資質。
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討論與結論

1. 病毒滴度的變化:接種病毒后,動物肺組織PVM?RT-PCR檢測可檢出病毒,病毒滴度在感染后3天達到高峰,并可維持至7日,隨后滴度下降。

2. 感染動物體重較之未感染動物體重下降,動物多出現豎毛,弓背等癥狀。嚴重者體重下降,行動出現遲緩,耳及尾可見紫紺,震顫,處于瀕死狀態。用于藥效評價實驗時,應控制感染劑量,降低因感染出現的急性死亡(4日內)。6~7日的死亡率可作為藥效評價的指標。

3. 病理損傷以充血、出血、肺組織水腫以及炎細胞浸潤為標準,應測定肺間隔,以及肺通氣水平,進而評估肺呼吸能力。

4. 炎癥因子重點關注IL-1β,IL-6,IL-18,MCP-1,IFN-γ等。

進行人類RSV 肺炎感染研究,國內外推薦使用PVM做替代實驗。PVM的毒株不同,實驗動物的品系不同,動物的臨床表型也會存在差異。本模型的表型與國外進行的模型研究表型相似,在急性期的死亡率較低,有較長的臨床治療的窗口,可用于免疫治療的療效評價。

生物安全性

PVM為低于人間傳染病名錄三級安全風險的病原,人類感染的風險低,但不排除對免疫功能缺陷者的致病性。

PVM是嚙齒類實驗動物必須排除的病原體,對動物有致病性。會干擾其他實驗研究。

鑒于此,此感染實驗必須在BSL-2級以上的生物安全實驗室進行病原學實驗,在ABSL-2實驗室進行動物實驗

評價驗證

本模型主要表現為腦組織的病理學改變:注射后48 h內 死亡或出現非特異性麻痹癥狀者剔除不計,中途死亡及到期處死動物,做中樞神經系統病理組織學 檢查。動物在給藥21d 后,進行安樂死并解剖。將脊髓法中的半切面評分法用于腦內法病理改變的評價方法,分別對腦組織、脊髓頸膨大和腰膨大的半 切面病變進行評分,并對這三個部位的平均病變分 值進行計算,根據分值并參考具體情況進行病變程度的判定。評分標準如下: 0分,未見 病變;1分,輕微病變,僅有炎細胞浸潤,未見神經元 損害;2 分,輕度病變,炎細胞浸潤伴有少量的神經元損害;3 分,中度病變,炎細胞浸潤伴有廣泛的神經元損害;4 分,重度病變,大量的神經元損害,伴或不伴有炎細胞浸潤。

制備方法

使用腦立體定位儀將微量注射器針頭插入丘腦,在兩側丘腦分別注入0暢5 mL脊髓灰質炎疫苗樣 品,原倍濃度及10-1濃度各 10只。 注射后48 h內 死亡或出現非特異性麻痹癥狀者剔除不計,中途死亡及到期處死動物,做中樞神經系統病理組織學 檢查。動物在給藥 21 d 后,進行安樂死并解剖。完整 取出腦組織及脊髓,10%甲醛溶液充分固定后,進行取材。 取材時首先尋找腦頂葉區注射點,在注射點前后各取一個切面,以確保取材部位包含針跡。取 材部位包括:額葉、頂葉、注射點、顳葉、枕葉、海馬、 基底節、丘腦(以上部位左右大腦雙側取材)、中腦、 小腦、腦橋、延髓、頸膨大、腰膨大。

研究背景

一、疾病名稱

脊髓灰質炎是一種急性傳染病,傳播廣泛,病原為脊髓灰質炎病毒。 此病毒常侵犯中樞神經系統,損害脊髓前角運動神經細胞,導致肢體松弛性 麻痹,多見于兒童,故又名小兒麻痹癥

二、疾病臨床表現及致病機制

是一種急性傳染病,傳播廣泛,病原為脊髓灰質炎病毒。此病毒常侵犯中樞神經系 統,損害脊髓前角運動神經細胞,導致肢體松弛性麻痹,多見于兒童,故又名小兒麻痹癥

目前包括我國在內的140 多個國家仍以口服脊髓灰質炎減毒活疫苗作為主要 預防措施,因疫苗可能會在某些情況下恢復神經毒 性而引起脊髓灰質炎病變,對其安全性進行恰當評價是非常重要的工作。

三、模式動物

獼猴在進化上與人類高度同源,種屬差異小,在組織結構和生理特征上與人類極為相似,這一突出特點奠定了恒河猴動物在藥物生產和評價、功能和進化比較基因組學研究、人類重大疾病模型復制和應用、再生醫學等研究領域中不可或缺的優勢地位。

模型信息

中文名稱:脊髓灰質炎恒河猴模型

英文名稱:NA

類型:脊髓灰質炎動物模型

分級:NA

用途:用于脊髓灰質炎研究。

研制單位:中國醫學科學院醫學實驗動物研究所

保存單位:中國醫學科學院醫學實驗動物研究所

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