高鹽誘導鹽敏感高血壓大鼠模型

健明迪檢測提供的高鹽誘導鹽敏感高血壓大鼠模型,討論與結論 動物癥狀觀察: 表現為體重減輕、弓背豎毛,在回輸后的一個月后死亡,具有CMA,CNAS認證資質。
高鹽誘導鹽敏感高血壓大鼠模型
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討論與結論

動物癥狀觀察:

表現為體重減輕、弓背豎毛,在回輸后的一個月后死亡。

生物安全性

實驗中涉及動物的操作程序已經得到中國醫學科學院醫學實驗動物研究所實驗動物使用與管理委員會的批準(ILAS-GC-2012-001)。

評價驗證

1. 高鹽飲食對血壓的影響

高鹽(8%的NaCl)喂養2周后,Dahl/鹽敏感大鼠血壓開始升高,4周后,鹽敏感大鼠高鹽喂養組血壓顯著高于對照組,而鹽敏感對照大鼠組血壓差異不顯著。

圖1. 高鹽和低鹽喂養后,鹽敏感性血壓大鼠和對照大鼠血壓的變化

(注:* P<0.05, Dss+High saltvs. control+High salt, t test n=5;#P<0.05 vs.Dss+High salt vs. Dss+Low salt, t test, n=5)

2. 腎臟組織病理結果

Dahl/鹽敏感大鼠高鹽(8%的NaCl)喂養4周后,腎小管萎縮,敏感對照大鼠腎組織未見明顯損傷。

圖2.大鼠腎臟組織HE染色(×400倍)

3. 炎癥細胞浸潤

Dahl/鹽敏感大鼠高鹽(8%的NaCl)喂養4周后,CT3標記的T淋巴細胞及CD68標記的巨噬細胞在腎組織中表達顯著多于對照組,腎臟發生炎癥反應。

圖3.大鼠腎臟組織CD3(T淋巴細胞)和CD68(巨噬細胞) 免疫組化(×400倍)

4. 血小板相關指標的測定

4.1 血小板活化測定:流式細胞術檢測發現Dahl/鹽敏感大鼠高鹽(8%的NaCl)喂養4周后,P-選擇素表達顯著高于其它組,血小板發生活化;

圖4. 鹽敏感大鼠和對照大鼠高鹽喂養和低鹽喂養后血小板活化(注:*P<0.05, Dss-H vs. others, one-way ANOVA, Scheffe`s test,n=5)

4.2 血小板內鈣離子濃度的測定:血小板內鈣離子濃度Dahl/鹽敏感大鼠高鹽(8%的NaCl)喂養組顯著高于其它組。

圖5. 鹽敏感大鼠和對照大鼠高鹽喂養和低鹽喂養后血小板內Ca2+的濃度(注:*P<0.05, Dss-H vs. others, one-way ANOVA, Scheffe`s test,n=5)

4.3 血小板細胞膜離子通道NHE-1表達量的變化:Dahl/鹽敏感大鼠高鹽(8%的NaCl)喂養組血小板細胞膜的那氫交換體1的表達量顯著高于其它組。

圖6. 鹽敏感大鼠和對照大鼠高鹽喂養和低鹽喂養后血小板細胞膜NHE-1蛋白的表達(注:*P<0.05, Dss-H vs. others, one-way ANOVA, Scheffe`s test,n=5)

5.腎臟炎癥因子IL-6的表達

免疫印跡結果顯示,Dahl/鹽敏感大鼠高鹽(8%的NaCl)喂養組腎臟IL-6的表達顯著高于其它組。

圖7. 鹽敏感大鼠和對照大鼠高鹽喂養和低鹽喂養后大鼠腎臟內IL-6的表達

(注:*P<0.05, Dss-H vs. others, one-way ANOVA, Scheffe`s test,n=5)

制備方法

1.Dahl/鹽敏感大鼠(Dahl/SS),名稱:SS/JrHsdMcwiCrlVr,近交系(Inbred Rat)

品系來源 :1962年,Brookhaven國家實驗室的LK Dahl從SD封閉群中選育出對NaCl引發的高血壓敏感/抗性的大鼠種群,1986年,俄亥俄醫學院的John P Rapp利用該核心群得到Dahl 鹽敏感/抗性大鼠,Harlan實驗室從俄亥俄醫學院引進, Theodore Kurtz(UCSF, CA)從SS/Jr種群中一組同品系的對照Dahl/SS大鼠近交得到 Dahl /鹽敏感大鼠,1991年以后,威斯康星醫學院一直維持該種群 2001年引入Charles River ,2011年維通利華從Charles River引入第17代核心群。

2.鹽敏感大對照鼠SS-13BN Rat,名稱:SS-Chr13BN/McwiCrlVr,同類系(Consomic Rat)。

3.誘導方法:6周齡Dahl/鹽敏感大鼠及鹽敏感對照大鼠SS-13BN,分別給予高鹽飲食(8%的NaCl)和低鹽飲食(0.12%的NaCl),連續4周,每周測量血壓。

研究背景

高血壓是由多基因、多環境因素及個人不良習慣相互作用而導致的一種慢性復雜疾病,也是危害人類健康的主要疾病之一。鹽是高血壓的重要環境因素,個體對鹽負荷或限鹽呈現不同的血壓反應,因此存在鹽敏感性問題。鹽敏感性是高血壓、心腦血管病和其它疾病(如哮喘、胃癌和腎功能不全等)發病及致死的一個潛在危險因素。因此在高血壓臨床診治過程中,考慮鹽敏感性將有利于對高血壓分類、危險分級以及對癥治療。

鹽敏感性通常涉及人口、種族、社會因素以及腎功能、激素水平和飲食習慣等。不同種族和人群鹽敏感性個體的檢出率不同,而且血壓的鹽敏感性隨年齡增長而變化,特別是高血壓患者。鹽敏感性由Weinberger給出定義:靜脈滴注2L生理鹽水,測量平均動脈壓(MAP),次日早晨給予低鈉飲食后再測量MAP,兩次MAP相差≥10mmHg為鹽敏感性,否則為鹽耐受性。Yatabe定義鹽敏感指數(SSI)為低鹽和高鹽飲食后MAP的差值與低鹽飲食MAP的商,若SSI≥5%為鹽敏感性。

對于鹽敏感性高血壓患者,高鹽攝入引起血壓升高主要有兩方面原因:一方面是腎小管對Na+ 重吸收增加,導致水鈉潴留,血漿容量增加,從而血壓升高;另一方面是內源性哇巴因物質分泌增多,特異性抑制鈉泵,胞內鈉離子濃度增加,Na+/Ca2+交換體被激活,細胞內Ca2+ 濃度升高,最終導致血管平滑肌或心肌收縮,引起高血壓。

模型信息

中文名稱:高鹽誘導鹽敏感高血壓大鼠模型

英文名稱:SS/JrHsdMcwiCrlVr

類型:高血壓動物模型

分級:NA

用途:用于高血壓研究。

研制單位:中國醫學科學院醫學實驗動物研究所

保存單位:中國醫學科學院醫學實驗動物研究所

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